一(yī)、了解CAR-T細胞産品

　　制備質粒載體(tǐ)：從工(gōng)作種子庫中(zhōng短務)取一(yī)個或幾個菌種，複蘇後逐漸擴大(dà)培養，然後提取質粒，純化除妹師菌過濾，成為無菌質粒載體(tǐ)。

　　病毒載體(tǐ)的制備：從工(gōng)作細胞庫中(zhōng秒知)取出一(yī)個或幾個冷凍細胞，複蘇合并中睡後，在适當的培養設備中(zhōng)逐漸擴大(dà服聽)培養，然後加入适當比例的質粒載體(tǐ)轉染細胞繼續培養，收獲培養上的清液并銀視純化，濃縮除菌過濾後成為無菌病毒載體(tǐ)的懸房弟液。

　　CAR-T細胞的制備：将收集到的細胞分(就藍fēn)離(lí)為單核細胞，然後分(fēn)離(lí)、激活和轉移T細制音胞，最後擴展、收集、洗滌和制備CAR-T細胞。

　　二、CAR-T細胞實驗室設計原則

　　根據生(shēng)産工(gōng)藝和操作程序，工(gōng)廠工(gō要家ng)藝布局各行其道，快速通暢，避免材料迂回穿梭，人員(好現yuán)穿越崗位，盡量減少錯誤和交叉污染。

　　三、CAR-T細胞實驗室走道形式

　　制備質粒載體(tǐ)和病毒載體(tǐ)的車(chē)間(實月請驗室):均為常規細菌發酵和細胞培養車(chē)間，可設計為影能單走道。

　　CAR-T細胞制備車(chē)間(實驗室):操作人員(腦爸yuán)和物(wù)品從潔淨走廊進入CAR-T細胞制備單元。生紅操作完成後，人員(yuán)和物(wù)品退出污水走廊，人員(yuán)退舊短出更換房間，廢物(wù)通過廢物(wù)專用設施和成品專用設施退出。很遠

　　四、CAR-T細胞實驗室設計重點(環境要求)

　　質粒載體(tǐ)和病毒載體(tǐ)可以在生(shēng)産終端進行消毒過綠紙濾，因此發酵區和健康細胞區可以在D級環境中(zhōng)生(s飛事hēng)産(發酵罐系統)，純化區和病毒區需得金要在C級環境中(zhōng)生(shēng)産，質粒和病毒的最終産品是無著章菌的，因此最終的消毒過濾和灌裝需要在C+ISOLATOR或B+A靜服環境中(zhōng)進行。

　　CAR-T細胞的整個制備過程無法消毒過濾。每個制備商暗單元需要設計一(yī)個獨立的B級淨化空調。每個制備單元在制備一(機又yī)個人後需要對空調系統進行徹底消毒。為了提高制備知麗單元的利用率，空調系統需要設置兩種模式：生(shēn兵在g)産模式和消毒模式。生(shēng)産模式為回風運行，消毒短計模式為全排氣，消毒氣體(tǐ)迅速排出，議自消毒時間縮短。清潔走道、污垢走道等輔助房間設計為C級，可通過氣坐制閘與各制備單元連接降低生(shēng)産運行成本。